產品名稱:TriQuick 總RNA 提取試劑
產品型號:R1100
產品特點:TriQuick 總RNA 提取試劑 TriQuick Reagent 貨號 : R1100 規格 : 100ml保存 : 4℃避光保存,保質期 12 個月。
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TriQuick 總RNA 提取試劑 TriQuick Reagent
貨號 : R1100
規格 : 100ml
保存 : 4℃避光保存,保質期 12 個月。
產品簡介 :
本試劑是一種通用的總 RNA 提取試劑, 適用于動植物細胞或組織及細菌的總 RNA 抽提, 可有效防止 RNA在提取過程中的降解。 獲得的 RNA 可直接用于 Northern 雜交, 純化 mRNA, 體外翻譯, RNase 保護實驗, RT-PCR以及 cDNA 克隆等一系列操作。該試劑可用于 100 次總 RNA 提?。?0 平方厘米細胞或 100mg 組織)。
操洽說明: 自備新開封或lv仿,異丙醇,75%乙醇,DEPC 處理水。
1. 細胞裂解或組織勻漿 :
1)貼壁細胞:吸盡培養液,每 10 平方厘米(6 孔板孔或 35 mm 平皿)細胞加入 1 ml TriQuick Reagent,使其覆蓋培養細胞,再用吸管或加樣器吹打 2~3 次,細胞應完全裂解,然后轉移離心管中。
2)懸浮細胞: 離心收集細胞, 吸盡液體, 每五百萬一千萬 (5×10 6 -1×10 7 ) 動植物或酵母細胞, 或一千萬 (1×10 7 )細菌,加入 1ml TriQuick Reagent 。用吸管或加樣器吹打,使其完全裂解。某些酵母和細菌如裂解不充分,可用勻漿器勻漿,以確保其完全裂解。轉移離心管中。
3)組織:先將組織剪切成小塊,放入玻璃勻漿器內。冷凍組織可在研缽中研磨勻漿。每 50-100mg 組織加入 1mlTriQuick Reagent ,勻漿完全裂解。轉移離心管中。
裂解產物應呈澄清的透明粘稠液體。室溫放置 5 分鐘。對于多糖、蛋白等雜質豐富的組織樣品,勻漿后仍會存留有不溶物質,可 12000g 4℃離心 10 分鐘,然后吸取上清一新的離心管中。
2. 分離 :在裝有裂解物的離心管中加入 0.2 倍體積的lv仿(1 ml TriQuick Reagent 加入 0.2 ml lv仿),振蕩器上充分振蕩混勻 30 秒,室溫放置 2-3 分鐘。12000g 4℃離心 10 分鐘,然后吸取含總 RNA 的上層水相一新的離心管中,每毫升 TriQuick Reagent 約可吸取 0.5-0.6 ml。有機相和中間層含有 DNA 和蛋白質,應避免觸及。
3. 沉淀 :按每毫升 TriQuick Reagent 加入 0.5 ml 異丙醇,顛倒數次混勻,室溫沉淀 10 分鐘。12000g 4℃離心
10 分鐘,在管底可見 RNA 沉淀。棄上清,按每毫升 TriQuick Reagent 加入 1 ml 75%乙醇,輕輕顛倒混勻,以清洗 RNA 沉淀。12000g 4℃離心 2 分鐘,棄去液體,小心勿丟棄 RNA 沉淀。室溫倒置晾干 5~10 分鐘。
4. 溶解 :加入適量 DEPC 處理水使 RNA 沉淀溶解。存放于-80℃。
注意事項 :
1,RNA 提取過程中所用器皿、離心管、吸頭等應保證無污染無 RNA 酶。操作中應小心,防止外源性 RNA 酶污染樣品導致 RNA 樣品降解。
2,試劑中含有酚等有害物質,注意個人防護。
相關產品 :
R1600 DEPC 處理水
P1011 酚:lv仿:異戊醇= 25 : 24 : 1 ( PH<5.0 )
R1050 5×RNA Loading Buffer
M1010 10×MOPS 緩沖液
SR0020 RNAwait( 非凍型組織 RNA 保存液 )
TriQuick 總RNA 提取試劑 TriQuick Reagent
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參考文獻:
《Pro-apoptotic effect of TRAIL-transfected endothelial progenitor cells on glioma cells》 作者:Xin Deng,Wen Zhao,Laijun Song,Wei Ying,Xinbin Guo 期刊:Oncology Letters 影響因子:0.237 PMID:29545899
《Expression of estrogen receptor, androgen receptor, and progesterone nuclear receptor in sheep uterus during the estrous cycle》 作者:Hongwei Duan, Longfei Xiao, Junjie Hu, Yong Zhang, Xingxu Zhao, Wenbo Ge, Yuting Jiang, Liangli Song, Shanshan Yang, Wenze Luo 期刊:Reproduction in Domestic Animals 影響因子:1.638 PMID:31188500
《Profile of melatonin and its receptors and synthesizing enzymes in cumulus–oocyte complexes of the developing sheep antral follicle—a potential estradiol-mediated mechanism》 作者:Longfei Xiao, Junjie HuEmail authorView ORCID ID profile, Liangli Song, Yong Zhang, Weitao Dong, Yuting Jiang, Quanwei Zhang, Ligang Yuan and Xingxu Zhao 期刊:Reproductive Biology and Endocrinology 影響因子:2.852 PMID:30606208
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